［摘要］目的使用CRISPR/Cas9系统靶向小鼠ATP7B基因，建立高效的ATP7B基因CRISPR/Cas9编辑系统，模拟人ATP7B基因突变，为更深入地开展威尔逊病（WD）分子机制研究和疾病干预奠定基础。方法选择我国WD的热点突变，对应小鼠ATP7B基因上的突变区域，设计单向导RNA（sgRNA），构建表达质粒，并与Cas9表达质粒共转染到小鼠N2a细胞，采用药物（嘌呤霉素和杀稻瘟菌素）筛选阳性细胞并提取gDNA，将目标位点的DNA片段进行聚合酶链式反应（PCR）扩增，然后通过TA克隆序列结果分析对目标基因的打靶效率。结果成功设计sgRNAs序列，并使用CRISPR/Cas9系统编辑了小鼠ATP7B基因，编辑效率为53.85%，创建了ATP7B基因突变细胞模型。结论通过靶向小鼠ATP7B基因，成功构建CRISPR/Cas9系统，这对深入研究WD的致病机制、探讨WD的治疗具有重要意义。