目的观察分析人类精子在不同冷冻方法下的保存和复苏效果，为利用单精子卵细胞质内注射技术（ICSI）辅助治疗梗阻性无精子症不育患者提供帮助。方法选取2020年1月1日至12月31日该院91例就诊患者，正常精液标本40例，睾丸穿刺取精液标本51例。将每份精液三等分，Ⅰ组使用普通冷冻管、Ⅱ组使用0.25 mL麦管、Ⅲ组使用超微量麦管进行冷冻。多组间比较采用方差分析，其两两比较采用最小显著差异法（LSD法），冷冻前后采用配对t检验。结果3种载体冷冻复苏后精子总活力比例［Ⅰ组（35.68±13.65）%、Ⅱ组（38.03±12.08）%、Ⅲ组（40.13±12.03）%］与冷冻前［（72.70±18.14）%］比较，均显著降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。在正常精液标本中，Ⅲ组冷冻复苏后精子总活力和前向运动精子比例较高，Ⅲ组复苏率［（56.07±11.60）%］高于Ⅰ组［（49.05±12.82）%］，差异有统计学意义（P＜0.05）；睾丸穿刺取精液标本中，Ⅱ组和Ⅲ组冷冻复苏后活动精子比例［（22.59±8.02）%、（24.47±8.61）%］高于Ⅰ组［（17.77±9.63）%］，且Ⅱ组和Ⅲ组复苏率［（49.72±18.37）%、（52.96±17.55）%］均高于Ⅰ组［（34.73±25.09）%］，差异有统计学意义（P＜0.05），3种载体间复苏率由高到低排序为Ⅲ组>Ⅱ组>Ⅰ组。结论3种冷冻方法中超微量麦管最利于人类精子的冷冻保存，无论是对于正常来源的精子还是睾丸切开显微取精手术获取的精子，均表现出最佳保存效果。