目的 分析佛山市中医院产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(ECO)及肺炎克雷伯菌(KPN)的临床分布及耐药情况，为指导临床合理使用抗菌药物提供依据。方法 采用法国梅里埃VITEK Ⅱ compact全自动细菌鉴定仪对2016年1-12月的临床致病菌进行鉴定，采用琼脂纸片扩散法（K-B法）对分离出的ECO及KPN进行药敏试验。结果 临床分离得到613株ECO和238株KPN，主要分布于重症监护室（ICU）和骨科。其中产ESBLs的ECO有205株，阳性检出率为33.44%；产ESBLs的KPN有83株，阳性检出率为34.87%。除亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、复方磺胺甲噁唑、呋喃妥因以外，产ESBLs的ECO各种药物耐药率与非产ESBLs的ECO比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。本研究检出3株对碳青霉烯类药物均耐药的产ESBLs菌株。结论 产ESBLs菌株多药耐药现象显著，且出现碳青霉烯类耐药菌株，警示临床应重视广谱β内酰胺类抗菌药物和碳青霉烯类药物的合理应用，避免更严重的耐药菌产生。