*基金项目:国家自然科学基金项目(81760199);贵州省科技厅计划项目(黔科合基础研究生〔2018〕1185)
【摘要】目的研究Wnt糖基化终末产物(AGEs)/肿瘤坏死因子?α(TNF?α)模拟糖尿病伴牙周炎微环境时,Wnt信号通路因子DKK1对牙周膜干细胞(PDLSCs)骨向分化能力的影响。方法采用组织块酶消化法培养人PDLSCs;采用流式细胞仪进行PDLSCs间充质干细胞表面分子鉴定;采用重组外源性AGEs/TNF?α模拟糖尿病伴牙周炎微环境;将实验组分为对照组(PDLSCs组)、AGEs/TNF?α模拟糖尿病伴牙周炎微环境组(AT?PDLSCs组)及DKK1处理AGEs/TNF?α模拟糖尿病伴牙周炎微环境组(D+AT?PDLSCs组);采用逆转录?聚合酶链式反应(RT?PCR)及蛋白质印迹法(Westernblotting)检测成骨相关基因mRNA及蛋白的表达量。结果采用组织块酶消化法成功培养出牙周膜来源的细胞。经流式细胞仪检测,细胞阳性表达STRO?1、CD271、CD146、CD44、CD90,阴性表达CD45。碱性磷酸酶(ALP)及茜素红染色表明,AT?PDLSCs组的成骨能力受到抑制。RT?PCR检测结果表明,AT?PDLSCs组Runx2、ALP表达量最低,D+AT?PDLSCs组表达量高于AT?PDLSCs组,PDLSCs组表达量最高。Westernblotting检测结果表明,Runx2及Osterix表达水平趋势与RT?PCR结果相一致。结论AGEs/TNF?α模拟的糖尿病伴牙周炎PDLSCs骨向分化能力明显受损,D+AT?PDLSCs组PDLSCs骨向分化潜能可逆转,DKK1介导的Wnt通路可作为糖尿病伴牙周炎的潜在治疗靶点。
杨琨,李骏,丰奇昊,沈梦杰,陈谦谦,罗雅馨,刘琪. DKK1对AGEs/TNF-α微环境牙周膜干细胞骨向分化能力的影响[J].现代医药卫生,2018,34(17):2609-