【摘要】目的探讨胶原酶消化组织块结合法分离纯化新生兔肺成纤维细胞。方法取新生兔肺，剪成组织块，用Ⅳ型胶原酶轻度消化后，进行组织块贴壁培养，分离纯化肺成纤维细胞，然后进行原代、传代培养，用MTT法测定细胞生长曲线。结果组织块贴壁培养2d，镜下可见组织块周边有少量长梭形细胞逸出，4d时组织块周围有大量细胞爬出，生长迅速，7d时接近融合，9d时高度融合。传代2次后杂细胞基本去除，细胞活性状态较好的为1~4代。5~6代后细胞的增殖能力逐渐下降，细胞出现逐渐老化现象。结论Ⅳ型胶原酶轻度消化后结合组织块贴壁法是一种较为可靠快速的肺成纤维细胞分离纯化培养方法，使用该法可获得具有典型形态特征及活性较好的肺成纤维细胞。