小鼠原代成肌细胞分离、纯化及培养
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    【摘 要】 目的 建立小鼠原代成肌细胞分离、纯化及培养方法,并诱导其成肌分化,检测成肌分化过程中微小 RNA-1(miRNA-1)和miRNA-155表达情况。 方法 提取新生小鼠后腿肌肉,经胶原酶消化,利用细胞贴壁差异性分离及纯化原代成肌细胞。使用含马血清的分化培养基诱导其成肌分化,通过肌球蛋白重链抗体——MF20免疫荧光染色鉴定成肌能力。使用Taqman实时定量聚合酶链反应检测原代成肌细胞分化过程中miRNA-1和miRNA-155表达情况。结果 成功分离并纯化小鼠原代成肌细胞;成功诱导原代成肌细胞向骨骼肌分化,MF20免疫荧光染色呈阳性。原代成肌细胞在成肌分化过程中miRNA-1表达明显上升,miRNA-155表达明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论 成功构建了提取小鼠原代成肌细胞的方法,为进一步研究成肌分化过程中miRNA基因调控提供了体外模型。

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引用本文

熊 雷,何衍佶,戴 威,赵 圆,高彦飞,邓忠良,聂 茂.小鼠原代成肌细胞分离、纯化及培养[J].现代医药卫生,2017,33(3):337-

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