免疫磁珠法分离纯化乳鼠肾血管周细胞
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基金项目:四川省卫生厅科技资助项目(80173)。


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    【摘 要】 目的 通过建立肾原代细胞培养,探讨免疫磁珠分离纯化乳鼠肾血管周细胞的方法。 方法 选取健康BALB/c乳鼠肾脏,剪碎、消化和过滤制成细胞悬液,原代培养并传代(传3代)。免疫磁珠法分离出神经胶质细胞2型硫酸软骨素糖蛋白(NG-2);倒置相差显微镜观察细胞形态特点,免疫细胞化学检测NG-2、平滑肌肌动蛋白(SMA)和CD31表达,BrdU法检测细胞增殖活性,鉴定是否符合周细胞特征及纯化后的细胞是否具有增殖活性。 结果 纯化后获取的细胞宽大扁平,形态呈梭形、三角形或多边形并有突起。细胞核椭圆居中,多为单核,偶为双核,细胞质丰富,无接触性抑制生长,符合周细胞形态及生长特征。NG-2和SMA免疫细胞化学染色阳性表达,CD31免疫细胞化学染色阴性表达,符合周细胞特点。分离纯化后的细胞48、72 h细胞增殖率分别为(0.37±0.11)%、(0.42±0.10)%。 结论 免疫磁珠法可使周细胞从细胞成分复杂的肾组织中分离出来,并具有生物活性,可继续体外培养,为后续研究提供参考依据。

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王 丽,马跃荣.免疫磁珠法分离纯化乳鼠肾血管周细胞[J].现代医药卫生,2016,32(16):2453-

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