【摘 要】 目的 构建一种由腺病毒AdMax包装系统表达目的基因——黑色素瘤分化相关基因-7（MDA-7）的复制缺陷型腺病毒，并初步探索其抗肿瘤活性。 方法 通过基因操作技术将目的基因（MDA-7）插入到5型腺病毒AdMax包装系统的E1A 区域，构建复制缺陷型腺病毒Ad.hMDA-7-EGFP；同时构建对照病毒Ad.EGFP。病毒滴度计算按寇化法（Karber法）进行腺病毒感染性滴度（TCID50）测定。应用免疫组化染色法检测MDA-7在感染2种病毒的肺腺癌A549细胞中的表达状态；通过二苯甲亚胺-碘化丙啶（Hoechst33342-PI）双染色法及流式细胞仪检测2种病毒对肿瘤细胞杀伤的差异。 结果 成功构建携带目的基因的腺病毒载体，经聚合酶链反应（PCR）鉴定正确；MDA-7在感染Ad.hMDA-7-EGFP的肺腺癌A549细胞中表达，以相同感染复数（MOI）值感染Ad.EGFP时肺腺癌A549细胞中未检测到MDA-7表达；Ad.hMDA-7-EGFP对肿瘤细胞株杀伤能力明显高于Ad.EGFP。 结论 成功构建复制缺陷型腺病毒Ad.hMDA-7-EGFP，并证实MDA-7蛋白在肿瘤细胞中过表达，诱导肺腺癌A549细胞株发生凋亡。