目的 构建稳定表达表皮生长因子受体(EGFR)胞外区(EGFRex)的NIH3T3细胞株。 方法 构建带有EGFRex基因的重组真核表达质粒PLNCX2-EGFRex,经脂质体法转染NIH3T3细胞后,用G418筛选阳性克隆,用免疫组化和蛋白质印迹(Western blot)检测EGFRex蛋白的表达,用EGF-EGFP蛋白检测其活性。 结果 成功构建了真核表达载体PLNCX2-EGFRex。以其转染NIH3T3细胞后,经免疫组化和Western blot检测到EGFRex的表达。在荧光显微镜下见细胞膜上有绿色荧光。 结论 人EGFRex在NIH3T3细胞内以其天然活性形式稳定表达,为抗体制备奠定了基础。
江秀玲,胡有根,石必枝.稳定表达EGFR胞外区的NIH3T3细胞株的建立及鉴定[J].现代医药卫生,2013,29(3):327-