目的探究微小RNA-944（miR-944）在乳腺癌细胞对他莫昔芬(TAM)耐药中的作用及相关机制。方法构建人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/TAM，通过microarray实验筛选耐药细胞MCF-7/TAM与亲代MCF-7细胞中差异表达的miRNA，选择miR-944作为研究对象，分为control组（未转染）、NC mimic组［转染空载体（NC mimic）］和miR-944 mimic组［转染miR-944模拟物（miR-944 mimic）］。采用荧光定量聚合酶链反应法验证miR-944在MCF-7细胞耐药后的表达变化，四甲基偶氮唑盐法检测细胞耐药性变化，流式细胞术检测细胞凋亡水平；采用Target Scan靶点预测软件预测miR-944作用靶点，双荧光素酶报告基因实验、蛋白质印迹实验验证miR-944与靶基因--RAS抑制蛋白1（RSU1）的相关性。结果MCF-7/TAM细胞相对于MCF-7细胞对TAM的耐药性明显增加。miR-944在MCF-7/TAM细胞中表达明显降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；与control 组、NC mimic组比较，miR-944 mimic组细胞耐药性明显降低，凋亡水平明显升高，差异均有统计学意义（P＜0.05）。miR-944靶向作用于RSU1，并通过双光素酶报告基因和蛋白质印迹实验得到验证。结论MiR-944能通过靶向调控RSU1，逆转MCF-7/TAM细胞对TAM的耐药性。