目的调查某高校公共卫生学院和生命科学院学生对实验室生物安全知识的认知及行为现状，为优化管理及培训模式提供依据。方法使用问卷收集该高校两学院学生的实验室生物安全知、行资料。结果生物安全知识的总体知晓率处于中等水平(66.25%)，但危害标识的知晓率偏低(24.14%);在基本安全行为方面，总体执行率较高(95.13%)，但仍有15.59%的学生不佩戴防护用品。回归分析结果显示，年级(P<0.001)和接触实验室时间(P=0.009)是影响安全知识知晓程度的显著因素；接触实验室时间(P=0.001)与安全知识知晓程度(P<0.001)是影响安全行为的显著因素，性别和专业对知识和行为的影响均不显著(P＞0.05)。结论该校两学院学生实验室基本安全行为规范性较好，但知识掌握明显不足。建议实施优化措施，系统提升生物安全行为规范性。